《植物生理学报》 2019, 55(4): 503-510

桃转录因子PpWRKY11的克隆及表达分析

王庆杰, 张泽杰, 高彦刚, 陈修德, 肖伟, 付喜玲, 李玲, 李冬梅^*, 高东升^*

作物生物学国家重点实验室, 山东果蔬优质高效生产协同创新中心, 山东农业大学园艺科学与工程学院, 山东泰安 271018

通信作者：李冬梅；E-mail: 李冬梅(dmli2002@163.com)、高东升(dsgao@ sdau.edu.cn)。

摘　要：

WRKY转录因子能够响应生物及非生物胁迫。本研究基于前期实验室桃花芽休眠解除前后表达量明显下调的Prupe.1G071400基因进行研究, 通过定量PCR表明此结果与前期实验结果相符合, 证明该基因可能与桃花芽休眠解除密切相关。从桃‘中油四号’叶片克隆了Prupe.1G071400基因, 通过生物信息学分析, 命名此基因为PpWRKY11; PpWRKY11蛋白编码282个氨基酸, 包含特有WRKY结构域。进化树分析发现PpWRKY11与蔷薇科苹果和梨等亲缘关系最为相近; 亚细胞定位显示PpWRKY11定位于细胞核中; 酵母双杂显示PpWRKY11蛋白没有自主激活活性, 进一步对PpWRKY11进行筛库, 筛选出互作的蛋白; 构建PGEX-PpWRKY11原核表达载体, 转化大肠杆菌Rosetta (DE3)诱导出符合大小的蛋白, 发现PpWRKY11蛋白主要在沉淀中。

关键词：桃; PpWRKY11; 芽休眠; 基因克隆; 亚细胞定位; 基因表达

收稿：2018-09-27   修定：2019-03-15

资助：国家自然科学基金(31872041)、山东省自然科学基金(ZR2018MC023和ZR201702200074)和山东省现代农业产业技术体系果品创新团队项目(SDAIT-06-01)